在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,動(dòng)物的肌肉組織、結(jié)締組織、骨組織、毛發(fā)組織等,植物的根、莖、葉、種子等均需磨碎,進(jìn)而對(duì)其成分、基因與蛋白質(zhì)及結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行研究。為了使各種組織成分在研磨過(guò)程中不易被破壞或降解,又為了使組織變硬、脆性增加,從而易于磨碎,特別是有關(guān)核糖核酸(RNA)、脫氧核糖核酸(DNA)的研磨分離提取。需要先將生物材料放置到液氮中快速冷凍,終止細(xì)胞內(nèi)外一切生物反應(yīng),同時(shí)生物材料細(xì)胞*凍硬、脆化,這樣研磨可以達(dá)到很好的破胞效果,將細(xì)胞磨成粉,使里邊的物質(zhì)釋放出來(lái)。
1.動(dòng)物組織研磨(均質(zhì)):將1-2g樣品加入15ml短研磨瓶(2251-PC)中,加入2個(gè)11mm鋼珠(2156)。研磨瓶置于冷凍盒(2660)中,在液氮中預(yù)冷10分鐘。預(yù)冷處理后,上機(jī)研磨。(針對(duì)2010,為保持夾具平衡,需同時(shí)運(yùn)行兩個(gè)冷凍盒)。設(shè)置研磨速度1500rpm,研磨時(shí)間2min。如果樣品必須出于低溫狀態(tài),在將樣品裝入研磨瓶之前,需在液氮中預(yù)冷凍研磨瓶。
2.植物組織研磨(分解):將50mg樣品加入2ml研磨罐中(2303-MM1),再將研磨罐置于2ml泡沫架中(2300),或者帶4mm研磨鋼珠(2150)的96孔深孔板(2200)中。上機(jī)研磨,設(shè)置研磨速度1500rpm,研磨時(shí)間1min。根據(jù)用戶(hù)方法一般需要加入裂解液或緩沖液。